血小板濃縮物在口腔種植中的應用

朱靖愷，劉  艷，謝  超，段  妍，馬  威

編者按：由中華口腔醫(yī)學會口腔種植專委會學術指導，江蘇省口腔醫(yī)學會口腔種植專委會主辦的“紫金杯”第二屆全國口腔種植修復辯論大賽于2018年8月4—5日在南京順利召開。辯題均為種植學熱點，各隊對辯題進行了充分地分析和文獻回顧，引發(fā)了口腔種植界的思辨熱潮。為了更好地給口腔屆同仁傳播本次辯論賽的精彩內容，我們約請各代表隊就他們的辯論內容進行歸納總結，按照比賽出場順序整理成“紫金杯”全國口腔種植辯論大賽選粹，以綜述形式呈現(xiàn)，每期一場，以饗同道。本期來自空軍軍醫(yī)大學口腔醫(yī)院種植科與南京醫(yī)科大學口腔醫(yī)學院的辯手就“CGF/PRF是否有必要作為GBR植骨術的必選項”展開了討論。

作者單位：空軍軍醫(yī)大學口腔醫(yī)院種植科，陜西西安（710032）

通信作者：馬  威 

E-mail：[email protected]

文章來源：口腔醫(yī)學2019年7月，第39卷，第7期

［摘要］牙體缺失后牙槽骨骨量不足向來是口腔種植中最為棘手的問題之一，而經過長期的探索研究，自體骨移植技術、引導性骨再生技術（GBR）等一系列經典術式應運而生，可以說在一定程度上很好地解決了這一問題。其中GBR技術更是以其成骨可預期性好，長期骨吸收率低，易充填塑形，無第二術區(qū)，手術并發(fā)癥少等優(yōu)勢得到了廣大種植醫(yī)生和患者的青睞。然而，隨著科技的進步，血小板濃縮物這一新技術開始嶄露頭角，并憑借著其獨有的優(yōu)勢在口腔種植領域的組織增量中占有一席之地，甚至向經典的GBR技術發(fā)起了挑戰(zhàn)。本文將重點對血小板濃縮物應用在口腔種植領域，特別是組織增量方面的優(yōu)勢作一簡要綜述。

［關鍵詞］血小板濃縮物；PRF；口腔種植；引導性骨再生

1、血小板濃縮物的生物學原理概述

   血小板濃縮物（血漿提取物生長因子）是一種富含白細胞和血小板的自體纖維蛋白物。主要包括富血小板血漿(platelet-rich plasma，PRP)，富血小板纖維蛋白（platelet-rich fibrin，PRF）、濃縮生長因子（concentrated growth factors，CGF）3類。

   其中PRF含有大量血小板、白細胞、纖維基質及多種生長因子［1］，是一種包含白細胞和富血小板纖維蛋白基質的濃縮物，可以通過細胞因子的調節(jié)作用以及纖維蛋白的支架作用促進組織修復。PRF源自于自體血液，具有低免疫性、可完全吸收等優(yōu)勢，PRF還可制備成液態(tài)、凝膠和固態(tài)，無論哪種形態(tài)都能保持其中含有大量生長因子，對軟組織形成和成骨均有積極的促進作用，是軟組織再生和骨再生研究中一種作用明顯、可塑性強、潛力巨大的自體生物材料。

   PRF可以在局部安全高效地釋放出多種生長因子，在這些生長因子的作用下，可以大大加快骨和軟組織的愈合［2］。Dohan等［3-4］研究發(fā)現(xiàn)，PRF可對人牙齦成纖維細胞、成骨細胞產生明顯而持久的誘導增殖作用，并且對成骨細胞產生較強的誘導分化作用。PRF可促進口腔骨髓間充質干細胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）的體外增殖及分化活性。同時，在Huang等［5］的研究中發(fā)現(xiàn)PRF可通過增加牙髓細胞（dental pulp cells，DPCs）中的骨保護素和堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）的表達，促進了DPCs的增殖和分化。大量研究發(fā)現(xiàn)，PRF富含血小板、生長因子、白細胞及纖維蛋白，PRF內血小板的細胞質中含有大量的α-顆粒，血小板被激活后，α-顆粒從細胞質中釋放出來的同時，大量胰島素樣生長因子（insulinlike growth factor，IGF）、血小板衍生生長因子（platelet derived growth factor，PDGF）、轉化生長因子（transforming growth factorβ1，TGFβ1）等具細胞因子也被釋放出來，這些細胞因子具有調節(jié)炎癥反應，刺激細胞在纖維蛋白基質內的移植和增殖的功效，并通過促進骨細胞，成纖維細胞的增殖與分化，促進了骨的生成及組織的修復。

2、血小板濃縮物制品的發(fā)展歷程

   血小板濃縮物制品的研究大致經歷了PRP、PRF、CGF 3個階段。

   1984年Assion首次從人血漿中提取PRP。20世紀90年代，臨床科學家Whitman和Marx將PRP應用于口腔研究之中，效果顯著。但隨著研究的進展，PRP的應用也存在著爭議。因為PRP的制備過程需要加入異種凝血酶和抗凝血制品，可能會導致免疫排斥反應的發(fā)生和感染性疾病的傳播；理想生長因子的釋放速度緩慢持續(xù)，而PRP的生長因子呈現(xiàn)快速“爆發(fā)式”釋放，使PRP作用于受損組織的時間相對縮短；PRP為較致密的四分子結構，不利于細胞生長因子的滯納和細胞長入等因素的制約，使得其應用受到限制。

   2001年，Choukroun等制備出了PRF，因富含白細胞，也稱L-PRF，成為第二代濃縮血小板制品。PRF具有以下優(yōu)點：無須添加抗凝劑及凝血酶制品，避免阻礙自然級聯(lián)凝血反應，從而有效避免了交叉感染的風險；PRF含有全血中98％以上的血小板、50％以上的白細胞。PRF與PRP的主要區(qū)別是白細胞的增加，從而抗感染能力和免疫調節(jié)作用增強；PRF可漸進性釋放細胞活性物質，使得各種細胞因子可充分與纖維蛋白分子發(fā)生化學鍵結合，發(fā)揮相互協(xié)同作用；PRF為三維立體網絡結構，與人類天然組織結構相似，具有疏松、孔隙大、彈性好，可滯留大量血小板及生長因子的特點，能夠誘導細胞遷移和細胞增殖，有利于營養(yǎng)物質彌散進入。Dohan等研究認為PRF具有逐步釋放細胞因子的生物特性，因為沒有加入任何的抗凝和促凝物質，其血液凝結過程完全模擬自然凝血的過程。成纖維細胞和成骨細胞的原代培養(yǎng)實驗表明PRF能夠明顯地促進細胞增殖和分化。

   CGF是Sacco首先研發(fā)的，與PRF一樣，CGF由靜脈血分離制備而成。不過，兩項技術的離心速度有所不同。與PRF不同，濃縮生長因子需要一個特殊程序的離心機(Medifuge MF200，Silfradent，F(xiàn)orli，意大利)，其離心使用的塑料管涂有二氧化硅顆粒，并且不添加外源物質。與富血小板纖維蛋白相比較，制備濃縮生長因子時其變速離心設定為2 400~2 700 r/min，從而使?jié)饪s生長因子形成生物因子含量更多、纖維蛋白更密集的纖維蛋白基質。

   隨著對PRF的深入研究，基于低速離心概念（LSCC）、對制備程序的優(yōu)化，又開發(fā)了加強型血小板纖維蛋白（advanced PRF, APRF）和注射型血小板纖維蛋白（injection PRF, IPRF）。較之PRF，這些新型的PRF基質富含各種炎癥細胞，包括白細胞和血小板，并且凝塊結構更為疏松多孔。

APRF：2013年，Choukroun對離心程序和試管做了進一步改進，提取出高級固態(tài)的APRF。該制品多孔結構疏松，纖維間隙較大，細胞（尤其是血小板）均勻地分布在整個凝塊中。組織細胞學分析顯示，相對PRF，APRF的中性粒細胞顯著增加。除含有生長因子外，還富含骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP），可直接誘導間充質細胞向成骨細胞分化。具有更強的促骨組織修復能力；且臨床使用更加多變，可剪碎與人工骨混合用于骨缺損區(qū)的植骨充填。

   IPRF：2014年，Choukroun使用特制的塑料管替代可以激活血液級聯(lián)凝血過程的玻璃管，采用低速離心理念（LSCC）及特定的制備程序（離心力60×g），獲得液態(tài)狀、可注射的IPRF。該血小板纖維蛋白制品初始物理狀態(tài)為液態(tài)，可注射到軟組織內加速組織血管化。液態(tài)IPRF會保持10~15 min的液體狀態(tài)然后凝結，結合骨材料成為富含大量生長因子和白細胞的膠凍狀移植物，緊密粘附和固定在組織缺損區(qū)域；并可根據(jù)植骨區(qū)域的不同形態(tài)大小制備相應的混合移植材料。因此，更適用于口腔外科治療及組織再生醫(yī)學領域。

3、血小板濃縮物在口腔種植領域中的應用

3.1 PRF在上頜竇提升中的應用

   PRF可以作為上頜竇提升的移植材料單獨使用，更多的時候與骨移植材料聯(lián)合使用，以提高上頜竇底提升區(qū)的空間維持能力以及血管生成潛力，縮短整體愈合時間。PRF在上頜竇黏膜穿孔的修復以及上頜竇提升入路窗口的關閉上也有不俗表現(xiàn)。

   PRF作為移植材料：Mazor等［6］的研究表示單獨使用PRF可以作為大多數(shù)竇底提升術的一種有效的治療方法。Tatullo等［7］及Zhang等［8］的研究則是將單獨使用骨移植材料和PRF與骨移植材料聯(lián)合應用對竇底的提升進行對比，雖然這些研究發(fā)現(xiàn)使用PRF獲得骨量的增加，但并無顯著差異。此外，上述研究均發(fā)現(xiàn)PRF結合骨移植材料可縮短愈合周期。

   PRF用于修復上頜竇黏膜穿孔：研究表明上頜竇底提升術有20％的黏膜穿孔率，為更好地解決這一問題，不少研究人員進行了積極探索。Aricioglu等［9］運用PRF與膠原膜修補新西蘭雌兔上頜竇瘺，效果二者未見明顯差異。Assad等［10］和Oncü等［11］臨床利用PRF進行上頜竇穿孔修補，并表示PRF作為一種生物性材料因其屬于自體組織、成本低且操作簡便，在未來可能成為修復上頜竇穿孔的一種選擇?？傊m然這些研究不能證實PRF比其他生物材料更為有效，但在易操作、低成本和高成功率等方面，PRF具有顯著優(yōu)勢。

   上述研究內容提示我們：PRF能夠縮短上頜竇外提升術的愈合時間，同時在不影響骨結合強度的前提下減少了術中移植材料的使用；PRF與自體骨聯(lián)用，可使種植體與骨結合速度加快，減輕患者術后疼痛等不良反應；由于采用PRF膜、Bio-Gide膜和膠原膜覆蓋上頜竇提升手術創(chuàng)面，在成骨率和骨替代率方面差異不顯著，而PRF具有制備簡單快捷、價格低廉等特點，使得其臨床應用占據(jù)一定優(yōu)勢。

3.2 PRF在牙槽窩處理中的應用

   PRF在拔牙窩封閉方面可以單獨使用以替代植骨材料或屏障膜，因其具有獨特的優(yōu)勢：可以直接暴露于口腔內，感染風險極低；在不會引起免疫反應的情況下加速傷口的自然愈合。因此，臨床操作時可將PRF用十字縫合的方式固位于牙槽窩內，無需同期關閉創(chuàng)口，一般經過3個月的愈合后，纖維蛋白基質將轉化為新生骨組織和被覆的軟組織。

   Hauser等［12］在23例患者的研究中發(fā)現(xiàn)，在拔牙后與種植體植入前種植位點的愈合階段，采用PRF填充拔牙窩比拔牙窩自然愈合減少了種植位點牙槽骨尺寸的變化。Girish等［13］發(fā)現(xiàn)第三磨牙拔除后用PRF填充處理牙槽窩骨量無顯著增加。Suttapreyasri等［14］通過觀察拔牙后創(chuàng)口愈合、牙槽嵴的外形及根尖片骨吸收情況來研究PRF對拔牙創(chuàng)的影響，結果顯示PRF對保存牙槽嵴和骨的形成效果并不顯著，但在拔牙后4周內對軟組織的愈合有加速作用。Hoaglin等［15］研究表明用PRF填充拔牙后的牙槽窩骨髓感染的概率為1%，對照組（自然愈合牙槽窩）高達9.5%，這項研究提供了PRF降低感染率的科學證據(jù)。另外，國內學者將PRF用于延期牙再植取得良好的效果［16］。因此，可以說在牙槽窩保存方面，與采用需覆蓋膜的外科手術相比，應用PRF既保存了殘留牙槽嵴的骨量、骨密度，又可降低手術成本、縮短手術時間，并且將感染風險最小化。

3.3 PRF在即刻種植中的應用

   種植體植入后頰側骨板與種植體之間跳躍間隙的處理是即刻種植的重要步驟，與采用全凝血塊或其他植入材料相比，PRF中的白細胞和生長因子可促進跳躍間隙骨缺損的愈合。Lee等的動物實驗表明，PRF植入跳躍間隙可以促進骨形成，PRF單獨或與植骨材料聯(lián)合使用，種植體-骨接觸率分別為61％與73％。

即刻種植需要考慮牙槽骨三維方面的骨量（唇頰向骨寬度、垂直骨高度、水平方向骨寬度）以及牙齦的質量，如果牙齦組織薄弱或缺損，在術后易發(fā)生感染和開裂，PRF憑借其優(yōu)秀的抗感染能力，可作為一種屏障膜將種植體和移植材料從口腔環(huán)境中保護起來；再者，PRF還可為上皮和內皮細胞提供生長因子、白細胞及半透性的纖維蛋白網狀結構，刺激血管生成，加速牙齦的愈合和成熟［17］。

3.4 PRF在種植體周圍軟組織愈合中的應用

   PRF可以刺激成纖維細胞有絲分裂，并誘導其向創(chuàng)口區(qū)域遷移，加速傷口愈合，避免術后軟組織裂開，其生物學效應還可影響牙齦成纖維細胞和牙周韌帶細胞的遷移，以及牙槽骨成骨細胞的增殖和分化［18］。同時PRF中還含有大量的免疫細胞，可以釋放修復介質，在減輕炎癥、抗感染以及疼痛控制方面具有良好的效果。Borie等［19］發(fā)現(xiàn)在增量手術中使用 PRF能夠獲得更好的切口愈合，更快的軟組織愈合以及更好的骨增量效果，減少了術后疼痛、腫脹和感染風險，這與PRF含有血液中98%以上的血小板、65%以上的白細胞有關。

   在促進組織愈合方面，Jankovic等［20］將PRF與釉基質衍生物和結締組織移植分別進行對比研究發(fā)現(xiàn)，PRF可減少并發(fā)癥，加快創(chuàng)口的愈合。類似研究中，F(xiàn)emminella等［21］對比PRF和明膠海綿治療結締組織移植后腭部供區(qū)的效果，并探索PRF在創(chuàng)口愈合中的特性，結果顯示PRF能顯著加速創(chuàng)口的愈合，降低并發(fā)癥發(fā)生率。

   在改善根面覆蓋率方面，PRF作為一種生物活性基質，被廣泛應用于修復牙齦退縮。關于冠向復位瓣技術聯(lián)合應用PRF與單純應用冠向復位瓣相比，有研究結果顯示聯(lián)合應用能顯著增加牙齦的根面覆蓋率［22-24］，這些結果提示在冠向復位瓣技術實施中，使用PRF有利于增加根面覆蓋率。

   另一方面，也有不少研究指出PRF對牙齦退縮的治療是有限的。2016年的一篇綜述表示聯(lián)合使用PRF對治療牙齦退縮，提高根面覆蓋率和附著水平均沒有顯著優(yōu)勢，與PRF相比，采用結締組織移植治療后角化齦黏膜寬度顯著增加，結果還表明，與釉基質衍生物和結締組織移植術相比，PRF并沒有提高根面覆蓋率、角化齦黏膜寬度和牙齦退縮Ⅰ或Ⅱ度患者的附著水平，但與其他方法相比降低了治療成本［25］。

3.5 PRF在引導性骨再生中的應用

   在實際應用中，一方面PRF膜可以作為GBR中的屏障膜：常規(guī)GBR技術常因植入生物材料使得創(chuàng)口關閉更加困難，術后種植體或植入的人工骨替代材料暴露，導致感染、骨形成不良，從而發(fā)生種植的失敗。而PRF膜含有大量宿主免疫細胞能抵抗口腔病原體，使得它可以直接暴露于口腔內且?guī)缀鯖]有感染的風險；另一方面，豐富的生長因子可促進傷口愈合，且PRF膜吸收時間為10~14 d，極大地減少了植骨材料暴露的風險。

   而PRF在GBR中更多的應用形式是被修剪成小碎塊與骨移植材料混合后作為骨增量材料，這種方法可以增加植骨材料的粘著性，便于操作，并且為生物材料增加了促進血管生成的生長因子。PRF含有血液中98%以上的血小板，研究證實血小板被激活后所含的α-顆?？梢葬尫懦龆喾N生長因子，這些生長因子都有促進骨再生和組織愈合的作用，所以骨移植材料與PRF的混合使用有助于生長因子更好地進入到骨缺損區(qū)，從而誘導間充質干細胞分化形成骨祖細胞，進而形成前成骨細胞，并且能夠吸引干細胞進入到骨缺損區(qū)，加速血管化［26］。Inchigolo等［27］把PRF用作一種骨移植物，將其與剛性鈦膜聯(lián)合用于兔顱骨骨缺損的骨修復中，結果顯示PRF與剛性鈦膜聯(lián)合運用于骨缺損的修復時，無論是在新骨形成的數(shù)量還是質量上均優(yōu)于人工骨粉(Bio-Oss)，從而證實了 PRF有助于骨移植材料中心部分的血管生成以及干細胞和成骨細胞的分化和遷移。Shah等［28］認為PRF聯(lián)合人工骨粉Bio-Oss可以加速新骨的形成，這種聯(lián)合對于單獨使用人工骨粉Bio-Oss是一個很好的替代，大量病例報告都表明在植骨材料中額外加入PRF提高了其成骨性能。Jang等［29］研究發(fā)現(xiàn)，將PRF與骨移植物組成的復合物應用于種植體的周圍骨缺損中，能明顯促進種植體周圍的骨缺損的修復。Sharma等［30］及高秀秋等［31］的研究均發(fā)現(xiàn)在添加PRF的實驗組中，GBR術后周圍骨密度及牙槽嵴骨寬度、骨高度均明顯優(yōu)于無PRF的對照組，即在種植體周圍骨缺損的修復中，使用PRF/Bio-Oss復合物的成骨效果明顯優(yōu)于單純使用Bio-Oss顆粒骨替代材料。

4、現(xiàn)階段血小板濃縮物的不足

   PRF的應用也有著相對局限的一面，PRF制作的成功及應用直接依賴于采血及離心的正確操作［32］。熟練及正確的采血、離心操作，手術過程中嚴格的無菌環(huán)境，規(guī)范的手術操作，手術前后對患者進行耐心教育等，均對PRF的最終預后效果有著至關重要的影響。由于在制備過程中血小板被活化，導致一定量的血小板和白細胞釋放的生長因子嵌入纖維蛋白網狀結構中，難以釋放到創(chuàng)傷組織中，從而對治療效果產生影響［33］。此外，還有文章［34］指出，PRF制備時間甚至試管壁材質、除水方法等細節(jié)問題，都會對其活性產生不同程度的影響。

   研究發(fā)現(xiàn)PRF可促進早期骨組織再生的速度，但不能增加新生骨的量，對于其成骨作用的遠期臨床效果還有待跟蹤觀察［35-36］。此外，在聯(lián)合其他材料應用時，與骨材料混合后PRF占有一定的空間，在術后數(shù)周，一旦PRF吸收，剩余相對疏松的骨材料對組織再生有無不良影響仍不十分確定。

   綜上所述，PRF為代表的血小板濃縮物的主要優(yōu)勢已獲得共識，其在支架、細胞、生長因子這三個方面與組織工程的三要素高度契合，是良好的生物因子儲備和釋放系統(tǒng)、生物相容性能良好的支架、促進創(chuàng)傷愈合的細胞聚集庫，因此，PRF能夠很好地促進骨組織修復、促血管化，加快愈合速度、縮短治療周期、增強局部免疫力、減輕術后反應，且作為自體血漿提取物，百分之百源于人體自身血液，是最為安全可靠的生物材料。部分需開辟第二術區(qū)獲取組織移植物的術式中，應用PRF作為替代物，還可在保證療效的前提下大幅減輕患者痛苦和經濟負擔。

   當然未來研究仍有許多難題有待攻克，如探索PRF在不同缺損組織中最佳的生長因子釋放濃度；如何克服研究患者個體化差異以及血細胞比容差異對PRF支架的影響等。隨著研究的深入，PRF將會以更多樣更有效的形式應用到口腔種植領域中來。

CGF/PRF尚不能成為引導骨再生術中的必選項

楊  益，沈  銘，路萌萌，邱  憬，湯春波

作者單位：南京醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院種植科，江蘇南京（210029）

通信作者：楊  益

E-mail:[email protected]

文章來源：口腔醫(yī)學2019年7月，第39卷，第7期

［摘要］患者牙齒拔除后常會伴有骨量不足，骨量不足的位點種植治療一直以來都被認為較為復雜。引導骨再生技術在解決骨量不足患者種植治療中取得了較好的效果。濃縮生長因子（concentrate growth factors，CGF）/富血小板纖維蛋白（platelet-rich fibrin，PRF）是一種新型的血漿提取物，其中含有轉移生長因子-β（TGF-β）、血小板衍生生長因子（PDGF）、類胰島素生長因子（IGF）、骨形成蛋白（BMPs）、血管內皮生長因子（VEGF）和表皮生長因子（EGF）等多種生長因子、血小板和纖維蛋白等。一些基礎研究和動物實驗證明其具有促進軟硬組織愈合的效果，目前也被應用于口腔再生治療中。很多學者將CGF/PRF引入到引導骨再生術中，期望能夠獲得更好的成骨效果，本文將對CGF/PRF應用于引導骨再生術中促進成骨作用的局限和不足作一簡要綜述。

［關鍵詞］濃縮生長因子；富血小板纖維蛋白；引導骨再生；口腔種植

   早在20世紀60年代末骨整合現(xiàn)象就已被發(fā)現(xiàn)，但直到80年代之前骨量不足的位點還被視為種植手術的局部禁忌證。80年代引導性骨再生技術（guided bone regeneration，GBR）概念被提出［1-2］，幾乎是在同時不可吸收屏障膜技術被引入到GBR植骨術當中［3］，到80年代后期骨移植材料也被引入GBR當中，90年代到現(xiàn)在的20多年可吸收的生物屏障膜+骨移植材料的GBR術式被長期并廣泛地使用。

   血漿提取物的發(fā)展大致經歷了富血小板血漿（platelet-rich plasma，PRP）、富血小板纖維蛋白（platelet-rich fibrin，PRF）和濃縮生長因子（concentrate growth factors，CGF）三個階段。PRF是第二代濃縮血小板，是富纖維蛋白凝膠，由患者靜脈中抽取的新鮮血液制作而成，其制備簡單，同時相對于PRP，其無需添加任何生物添加劑。CGF與PRF一樣是由靜脈血分離制作而成，不過，該技術的離心速度有所不同。CGF/PRF被廣泛應用于燒傷皮膚的再生以及糖尿病患者的壞疽處理。由于其中含有多種生長因子，如轉移生長因子-β（TGF-β）、血小板衍生生長因子（PDGF）、類胰島素生長因子（IGF）、骨形成蛋白（BMPs）、血管內皮生長因子（VEGF）和表皮生長因子（EGF）等，也被應用于口腔再生治療。近年來CGF/PRF也被引入GBR植骨術中使用，但其促進成骨的效果仍沒有達成廣泛的共識。

   目前臨床中，有兩種方式將CGF/PRF應用到GBR植骨術當中，第一種方式是將其延展壓平后當作屏障膜使用，另一種方法是將其修剪成小碎片，然后和骨移植材料混合來制作帶有CGF/PRF的骨移植材料。以下將從這兩種應用場景來簡述其在GBR中促進成骨效果的局限和不足。

1、CGF/PRF作為屏障膜使用

    在引導骨再生術中，需要使用可吸收或不可吸收的屏障膜，為骨組織的再生提供不受干擾的空間。如果使用CGF/PRF作為屏障膜，其相對目前臨床使用的可吸收生物膜是否具有優(yōu)勢？Gassling等進行了一項臨床研究［4］，研究納入了6例需要進行雙側上頜竇外提升的患者，在完成植入骨替代材料后，一側使用PRF壓制而成的屏障膜覆蓋開窗處，而另一側則使用目前臨床廣泛使用的Bio-Gide生物膜覆蓋，如圖1示，以對比兩者的差異。作者發(fā)現(xiàn)，術后患者兩側水腫、疼痛及初期創(chuàng)口愈合情況無明顯差異，術后5個月行種植體植入術時，作者同時取出部分骨組織行組織學評估，發(fā)現(xiàn)兩組在新生骨的比例和骨替代材料的剩余比例上均無差異。    

   學者研究發(fā)現(xiàn)，單獨使用CGF/PRF作為屏障膜，因為其降解速度較快，無法達到理想的屏障效果。當聯(lián)合生物膠原膜使用時，未見明顯的促進成骨效果，同時增加了手術費用和手術難度。亦有學者表示CGF/PRF作為膜使用，聯(lián)合生物膠原膜應用于GBR植骨術中時，可以促進局部軟組織的愈合，降低感染的幾率。

2、CGF/PRF口腔種植中促進成骨作用的研究

    因為PRF中含有生長因子，而體外實驗也證明了這些生長因子具有一定的促進成骨效果。學者也將其應用到了促進成骨的動物實驗中，Knapen等在兔的顱骨中研究了PRF的促進成骨效果［5］，結果在組織學和組織形態(tài)定量學的分析中（圖2、3）都沒能發(fā)現(xiàn)PRF有任何附加的影響。     

   Nejat在上頜竇外提升術中研究了PRF促進成骨的效果［6］，在實驗中對照單獨使用Bio-oss和Bio-oss聯(lián)合PRF在上頜竇提升術中的應用，在6個月的愈合期之后，對新生骨進行組織學和組織形態(tài)定量分析（圖4），發(fā)現(xiàn)兩組沒有差異。這就說明了PRF的使用并不能帶來更多更好的成骨效果。

   Diana等在2018年一項臨床隨機對照研究中發(fā)現(xiàn)［7］，PRF作為骨移植材料應用于即刻種植當中以驗證其能否加速骨結合的速度，研究結果表明無論使用PRF與否，種植體周圍骨結合形成的速度無差異。 

   CGF/PRF中含有大量的生長因子，但CGF/PRF中的生長因子的釋放高峰集中在15 min到1 d，隨后釋放量極速下降，有效的釋放周期也僅有10 d［8］。另一方面，間充質干細胞（MSC）具有分化成為內皮細胞、成骨細胞和軟骨細胞等的潛力，在其形態(tài)發(fā)生中需要多種細胞因子有序釋放、精確調控。而CGF/PRF同期釋放多種生長因子，釋放曲線各不相同，需要模擬體內環(huán)境、檢測多種生長因子同時釋放的協(xié)同和拮抗作用的嚴謹科學研究。

3、總結與展望

   回顧目前相關CGF/PRF與口腔種植治療引導骨再生術的相關文獻我們不難發(fā)現(xiàn)，其促進成骨的作用仍然存在一定的局限和不足。另一方面CGF/PRF在口腔其他領域中應用的文獻報道，在其中一些領域的應用已經獲得公認的較好的效果，比如促進拔牙創(chuàng)的愈合，促進軟組織愈合等，國內外也有學者報道了其在GBR植骨術中能促進軟組織愈合，但此類報道更多的還是局限于病例報道等，缺乏循證醫(yī)學效力等級更高的文獻報道，基于目前的研究我們有理由推測其能改善GBR植骨術術后局部炎癥反應同時促進愈合，但仍需要學者進行進一步的研究。